O que é imunoensaio quimioluminescente
O imunoensaio quimioluminescente (CLIA) é uma técnica de imunoensaio em que o marcador, ou seja, o verdadeiro "indicador" da reação analítica, é uma molécula luminescente. Em geral, luminescência é a emissão de radiação visível ou quase visível que é gerada quando um elétron faz a transição de um estado excitado para um estado fundamental. A energia potencial resultante no átomo é liberada na forma de luz. (Cinquanta, Fontana e Bizzaro, 2017) Os imunoensaios quimioluminescentes oferecem uma das melhores soluções para a quantificação de baixas concentrações de analitos específicos de uma mistura complexa para a indústria de diagnóstico in vitro. Eles também podem ser usados ​​como ferramentas de diagnóstico na medicina, bem como ser usados ​​em várias outras indústrias diferentes para diversas aplicações. (Lorne Laboratories, 2021)

Como funciona a quimioluminescência
O imunoensaio de quimioluminescência (CLIA) é um ensaio que combina as técnicas de quimioluminescência com reações imunoquímicas. O formato do ensaio é semelhante aos imunoensaios ligados a enzimas, geralmente baseados em ensaios heterogêneos em que anticorpos ou antígenos são imobilizados em uma fase sólida, mas um dos componentes é conjugado com um marcador quimioluminescente. (Lorne Laboratories, 2021) (BrightTALK, 2021) CLIA utiliza sondas químicas que podem gerar emissão de luz por meio de reações químicas para marcar o anticorpo. (Creative-diagnostics, 2021)

Os benefícios do imunoensaio de quimioluminescência
Nos últimos anos, CLIA tem ganhado atenção cada vez maior em diferentes campos, incluindo ciências biológicas, diagnóstico clínico, monitoramento ambiental, segurança alimentar e análise farmacêutica, porque há benefícios do uso de quimioluminescência, tais como:

• ultra-sensível
• boa especificidade
• ampla gama de aplicações
• equipamento simples
• ampla faixa linear
• mais fácil na operação e design
• pode detectar pequenas quantidades da molécula biológica
• não requer longas incubações e a adição de reagentes de parada (Creative-diagnostics, 2021)

Principais tipos de métodos de imunoensaio quimioluminescente
Os métodos quimioluminescentes comumente vistos são diretos - usando marcadores de luminóforo, indiretos - usando marcadores de enzimas ou eletrogerados – normalmente com base em nanomateriais. (Cinquanta, Fontana e Bizzaro, 2017) (Ju, Lai e Yan, 2017)

CLIA indireta, usando marcadores de enzima
Este método CLIA comum envolve uma enzima, normalmente peroxidase de rábano (HRP) ou fosfatase alcalina (AP), conjugada a um anticorpo secundário. Este HRP – ou o complexo de anticorpo secundário AP – então catalisa a conversão do substrato quimioluminescente, luminol e reagente CSPD, respectivamente. Esses substratos, quando oxidados, fornecem um meio fácil de detecção e quantificação do sinal devido à emissão prolongada do sinal. (Shimadzu, 2021)

CLIA direto, usando marcadores de luminóforo

Este método comumente usa ésteres de acridínio como luminóforos conjugados diretamente ao anticorpo monoclonal primário para gerar um sinal. Os ésteres de acridínio são marcadores altamente específicos que se oxidam espontaneamente na presença de peróxido de hidrogênio alcalino, produzindo um sinal a 429 nm em 2 segundos, em comparação com o luminol que gera um sinal de maior duração. (Shimadzu, 2021)

Quimioluminescência eletrogerada
O imunoensaio de eletroquimioluminescência (ECLIA) é um método quantitativo para medição de antígeno ou anticorpo baseado na mudança no sinal de eletroquimioluminescência (ECL) antes e depois da imunorreação. ECL é o processo pelo qual as espécies geradas no eletrodo sofrem uma reação de transferência de elétrons de alta energia para formar estados excitados que emitem luz. Analogamente ao CL, o ECL não requer o uso de fontes de luz externas. (Wu e Ju, 2012) (Ju, Lai e Yan, 2017)

Para concluir, CLIA direto é onde o próprio material excitante emite luz, enquanto, em CLIA indireto, a energia da reação química excita outro material. E, por último, ECLIA é a produção de luz por uma espécie de luminóforo excitado gerada durante uma reação eletroquímica. (Wu e Ju, 2012)

Ensaio de quimioluminescência iniciada por luz
O Ensaio Quimioluminescente Iniciado por Luz (LICA) é derivado do imunoensaio de canalização de oxigênio luminescente (LOCI) com as características desejadas. Semelhante ao princípio de LOCI, LICA é uma tecnologia homogênea à base de grânulos em que a proximidade de grânulos quimio e anúncios sensíveis (<200 nm) gera luz através de CL. Este método de imunoensaio homogêneo é capaz de determinação rápida e quantitativa de uma ampla gama de analitos - incluindo altas e muito baixas concentrações de moléculas grandes e pequenas, drogas livres (não ligadas), DNA e IgM específico. (Li et al., 2019)

O ensaio quimioluminescente iniciado por luz é um dos formatos emergentes de imunoensaio. Mais e mais fabricantes decidem desenvolver novos produtos com base nesta nova e inovadora tecnologia emergente porque há muitos benefícios em usá-la, que incluem:

• Homogêneo
• Alta sensibilidade
• Alta especificidade
• Alto rendimento
• Reprodutibilidade
• Ampla faixa de detecção
• Baixo volume de amostra
• Não requer uma etapa de lavagem (www.iivd.net, n.d.)

Durante os anos, muitos estudos de pesquisa se concentraram em descobrir a superioridade do ensaio de quimioluminescência iniciada por luz sobre os imunoensaios de quimioluminescência convencionais. No entanto, o LICA tem sido amplamente adotado em pesquisas biomédicas e pode se tornar uma tendência global na indústria de IVD para perspectivas futuras. (www.iivd.net, n.d.)

A Biotime vê o enorme potencial no Ensaio Quimioluminescente Iniciado por Luz do que podemos alcançar com esta plataforma, portanto, nosso novo analisador LICA deve chegar ao mercado no terceiro trimestre deste ano. Já existem alguns resultados promissores relatados por nossas equipes de pesquisa e desenvolvimento, pois estão trabalhando continuamente em experimentos laboriosos.

Aqui estão alguns teasers para você:

• Excelente desempenho
• Ampla faixa linear
• Boa reprodutibilidade
• Anti-interferência forte para garantir resultados de teste confiáveis
• Fase sólida
• Sem necessidade de rede de frio
• Condições normais de armazenamento
• Sem lavar
• Sem resíduos líquidos
• Economia de custo
• Pacote de teste único disponível
• Futuro pacote mais econômico e competitivo

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